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食品偵探系列 | 偵探們竭盡全力地證明了牛奶中蛋白質(zhì)測(cè)定的方法!

食品偵探系列 | 偵探們竭盡全力地證明了牛奶中蛋白質(zhì)測(cè)定的方法!
步琦  2021-12-08  |  閱讀:1071

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歡迎來(lái)到 “夏洛蔥” 和他的食品偵探們”博客!


在該博客中,我們可以賞讀到多個(gè)章節(jié)專(zhuān)門(mén)介紹負(fù)責(zé)檢測(cè)食品中分析物的五位食品偵探——夏洛蔥、蛋克力、梅蘋(píng)果、牛南希和玉米老伯;跟隨這五位偵探處理各種案件,解決食品分析方面的各類(lèi)難題;了解他們?nèi)绾握莆諜z測(cè)和確定分析物的方法,如各類(lèi)食品中的蛋白質(zhì)和脂肪;了解他們?nèi)绾纬浞掷脵z測(cè)工具和技術(shù),包括脂肪提取和凱氏蛋白測(cè)定等經(jīng)典方法,以及近紅外等現(xiàn)代方法。


他們?cè)诼贸讨幸矔?huì)互相培訓(xùn)各種優(yōu)化方法的課程:我們可以與他們一起學(xué)習(xí)優(yōu)化脂肪提取、蛋白質(zhì)測(cè)定、近紅外分析等技術(shù)的技巧,以用于各種與食品有關(guān)的應(yīng)用。這五位偵探如何開(kāi)始從事他們的職業(yè)?他們每個(gè)人給團(tuán)隊(duì)做出了哪些貢獻(xiàn)?


接下來(lái)請(qǐng)看每位偵探的身世。


夏洛蔥·福爾摩斯在十幾歲的時(shí)候就已經(jīng)闖出名氣,這要?dú)w功于他的敏銳頭腦和偵查天賦。他最擅長(zhǎng)通過(guò)對(duì)睡著的廚師進(jìn)行仔細(xì)的淚痕分析來(lái)發(fā)現(xiàn)誰(shuí)剛剛切開(kāi)了洋蔥社區(qū)的另一個(gè)成員。通過(guò)偷聽(tīng)他的父母討論一起臭名昭著的食品欺詐案,夏洛蔥-福爾摩斯受到啟發(fā),正式開(kāi)始做一個(gè)食品偵探,主要工作是在本應(yīng)只含有碎牛肉的千層面中混入馬肉。夏洛蔥-福爾摩斯對(duì)食品分析中使用的所有方法都非常了解。


蛋克力是一個(gè)典型的比利時(shí)食品偵探,既理性又以雞蛋自我為中心。蛋克力由一只母雞和一只公雞所生,這兩只雞開(kāi)辦了自己的私家偵探事務(wù)所。蛋克力有著嚴(yán)肅的外表和敏銳的目光,能夠發(fā)現(xiàn)最微小的細(xì)節(jié)。蛋克力的人生使命是試圖證明比利時(shí)美食優(yōu)于其他美食,擁有更好、更健康的食材。他致力于美化宣傳比利時(shí)洋蔥湯,這讓夏洛蔥-福爾摩斯大為震怒,因?yàn)樗毁澇稍跍惺褂米约旱谋硇值堋_@一爭(zhēng)論點(diǎn)導(dǎo)致這兩位偵探之間經(jīng)常發(fā)生同事間的爭(zhēng)吵和“友好”的摩擦。但應(yīng)該指出的是,他和夏洛蔥-福爾摩斯同樣精通食品分析中使用的所有方法。


梅蘋(píng)果是該團(tuán)隊(duì)中經(jīng)驗(yàn)最豐富的食品偵探。她依稀記得,她是在追捕一只試圖吃掉她妹妹部分身體的黃蜂時(shí),對(duì)偵探調(diào)查事業(yè)產(chǎn)生了興趣。就像葡萄酒一樣,梅蘋(píng)果的頭腦似乎也隨著年齡的增長(zhǎng)而越來(lái)越好。她在使用如她一樣經(jīng)典的參考方法時(shí)特別自信。梅蘋(píng)果非常喜歡甜食,她是所有水果類(lèi)制品無(wú)可爭(zhēng)議的專(zhuān)家,如果汁、醬汁和水果派,甚至包括蘋(píng)果派。


牛南希很年輕,但她并不是一塊生牛排。這位少女給團(tuán)隊(duì)帶來(lái)了一股新鮮空氣和現(xiàn)代氣息。從她記事起,這位充滿(mǎn)熱情的偵探就對(duì)自己的身世感到好奇,并一直試圖追蹤她所來(lái)自的牛群,她試圖通過(guò)對(duì)她遇到的每一頭牛做仔細(xì)和有條不紊的測(cè)試來(lái)實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。但瑞士有很多牛,所以為了掙錢(qián)和改進(jìn)她的檢測(cè)方法,她欣然加入了食品偵探事務(wù)所。耐心不是她的專(zhuān)長(zhǎng),但近紅外技術(shù)無(wú)疑是。


玉米老伯是一位研究痕跡分析和罕見(jiàn)案件的專(zhuān)家。他一直被未知事物所吸引,因?yàn)樗谝粋€(gè)農(nóng)場(chǎng)長(zhǎng)大,經(jīng)常受到玉米麥田怪圈的影響。他至今為這種神秘的現(xiàn)象所困惑,他熱衷于各種外來(lái)的、奇怪的未解之謎。他經(jīng)常為團(tuán)隊(duì)提供最特別的想法和解決方案,是近紅外分析的忠實(shí)粉絲。



今年萬(wàn)圣節(jié),偵探們得到了一個(gè)非常好的案件,既一位客戶(hù)請(qǐng)求他們幫助測(cè)定牛奶中的蛋白質(zhì)。玉米老伯中尉帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì)使用凱氏定氮技術(shù)測(cè)量了兩種不同牛奶樣品中的酪蛋白含量。但檢測(cè)結(jié)果是給客戶(hù)驚喜還是驚嚇了?請(qǐng)繼續(xù)往下閱讀,我們拭目以待吧!



這是一個(gè)美麗的早晨,紅葉在秋日低沉的陽(yáng)光下閃閃發(fā)光。偵探們聚集在貨運(yùn)自行車(chē)的后備箱里,夏洛蔥踩著腳踏載著他們?nèi)グ菰L(fǎng)一位客戶(hù)。當(dāng)他們把車(chē)開(kāi)進(jìn)一個(gè)牛奶場(chǎng)時(shí),他們高興地喋喋不休。客戶(hù)很高興地向他們展示她的奶牛,并讓他們品嘗新鮮牛奶。他們坐在她的花園里,吃著新鮮的餡餅,周?chē)茄b滿(mǎn)南瓜和新鮮蘋(píng)果的籃子,開(kāi)始討論這個(gè)案子。



偵探們向她保證,他們將展示最適合她的技術(shù)。他們騎上自行車(chē)返回辦公室,夏洛蔥抱怨說(shuō),在他們吃了那么多餡餅之后,車(chē)騎起來(lái)困難得多了,偵探們都笑著為他加油。


接下來(lái)發(fā)生的事情對(duì)夏洛蔥來(lái)說(shuō)是難以預(yù)料的。這五名偵探都想負(fù)責(zé)牛奶中蛋白質(zhì)的測(cè)定,隨后發(fā)生了一場(chǎng)激烈的爭(zhēng)吵。蛋克力堅(jiān)稱(chēng)他最了解牛奶,因?yàn)殡u蛋是白色的,牛奶也是。梅蘋(píng)果反駁他,說(shuō)沒(méi)有什么比牛奶和蘋(píng)果派更好的了。而牛南希想要輪到她,因?yàn)槭聦?shí)上大部分牛奶都來(lái)自于她的親戚。


夏洛蔥決定通過(guò)測(cè)驗(yàn)解決爭(zhēng)論。




所以玉米老伯中尉被授予了這個(gè)案子!盡管他更像是一名 NIR分析專(zhuān)家,但他很樂(lè)意深入研究牛奶中蛋白質(zhì)測(cè)定的經(jīng)典參考方法。


在快速翻閱他的教科書(shū)和一個(gè)凱氏定氮法知識(shí)庫(kù)后,他首先給出了該方法的總體觀點(diǎn)。他們將通過(guò)添加乙酸溶液從測(cè)試樣品中沉淀酪蛋白。他們將用硫酸消化濾液,將氮轉(zhuǎn)化成硫酸銨。用 NaOH 堿化成氨后,將樣品中的氨用水蒸汽蒸餾到硼酸接收器中,再用鹽酸溶液滴定。最后,酪蛋白含量將是總氮含量與非酪蛋白氮含量之間的差值。后者將根據(jù)滴定液體積和樣品重量計(jì)算。


身為凱氏定氮法專(zhuān)家的梅蘋(píng)果贊許地點(diǎn)點(diǎn)頭,然后五人便著手實(shí)施牛奶中蛋白質(zhì)測(cè)定的計(jì)劃。首先,他們購(gòu)買(mǎi)了兩種類(lèi)型的樣品:全脂超高溫滅菌牛奶和半脫脂超高溫滅菌牛奶。


經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后,他們注意到樣品管不透明且呈綠色。梅蘋(píng)果建議在步驟 2 上再消化 30min,這樣就解決了問(wèn)題。他們讓樣品冷卻到環(huán)境溫度,然后進(jìn)行蒸餾和滴定,以測(cè)定牛奶中蛋白質(zhì)含量。


食品偵探們使用蒸汽蒸餾裝置進(jìn)行凱氏定氮分析,使用以下參數(shù)進(jìn)行蒸餾:




最后,他們準(zhǔn)備計(jì)算牛奶中蛋白質(zhì)的測(cè)定結(jié)果,首先用以下公式計(jì)算氮的百分比:



玉米老伯中尉高興地拍了拍手,是時(shí)候看看結(jié)果了!那就先考查牛奶中酪蛋白的測(cè)定結(jié)果。


首先,他們查看全脂牛奶樣品:




其中,樣品的平均空白體積為0.298 ml(n=4),測(cè)得的總氮含量為0.519%,以此來(lái)計(jì)算酪蛋白含量。

 

然后,他們考查了半脫脂牛奶樣品的數(shù)據(jù):




其中,樣品的平均空白體積為0.298 ml(n=4),測(cè)得的總氮含量為0.515%,以此來(lái)計(jì)算酪蛋白含量。


很快,他們將牛奶中蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法VDLUFA VI C30.4進(jìn)行了比較:



他們注意到對(duì)催化劑的選擇沒(méi)有影響,并注意到他們的方法比標(biāo)準(zhǔn)方法需要更少的水來(lái)消解樣品。與標(biāo)準(zhǔn)方法相比,他們?cè)谶^(guò)濾步驟前將體積和重量增加了一倍,但這樣做只是為了獲得足夠的濾液以在必要時(shí)消化樣品一式兩份。樣品與所用化學(xué)品的比率與官方方法相等。


總而言之,使用消化裝置和凱氏定氮系統(tǒng)測(cè)定牛奶中的蛋白質(zhì)為團(tuán)隊(duì)提供了可靠且可重復(fù)的結(jié)果,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較低,與文獻(xiàn)值相對(duì)應(yīng)(Souci Fachmann Kraut, CRC Press, 第7版, 2008年)。


偵探們高興地騎著自行車(chē)回到奶牛場(chǎng),將他們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果告知客戶(hù)。她很高興找到了一種測(cè)定牛奶中蛋白質(zhì)的好方法,可以將其提交給當(dāng)?shù)氐臋z測(cè)實(shí)驗(yàn)室了。偵探們告別農(nóng)場(chǎng)主后爬回貨運(yùn)自行車(chē)后備箱。夜幕降臨,夏洛蔥費(fèi)力地踩著腳踏自行車(chē)前行著,四名調(diào)查員蜷縮在溫暖的毯子下,仰望夜空,凝視銀河,這是非常成功的一天。

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